施甸县水苏糖
由于原料邻甲基苯胺来源的限制，原料成本较高，因而该法不适合于工业化
(1)用于表达单链典奈林的质粒结构
如图3-35所示，棉籽糖可以看作是萠糖的半乳糖衍生物，是一种三糖分 子。由于棉籽糖的半乳糖残基正好位于蔗糖C-6位上，充当着蔗糖C-6位上 天然?；せ诺慕巧Ｒ虼?，若以棉籽糖为原料，对其C-6、4\ l\ 6W进行选 择性氣化，再水解a-l，6-糖苷键除去半乳糖残基，即可得到三氣蔗糖，反应 过程如图3-36所示。
罗汉果中的甜味成分为三萜类糖苷Mogroside IV和V，化学结构如图4 -37所 示。其中以Mogmside V为主，属极性化合物，含有5个葡萄糖残基，在干燥果实 中的含量为1%。Mogroside V的分子SCmH,? 2H20,相对分子质量1322, 易溶于水，对热性质稳定，在沸水中保持5h未出现明显的分解现象，干燥条件 下加热至丨97?201X：可分解。以0.02%蔗糖液为对比物的分析结果表明，Mo- groside V的甜度是蔗糖的256倍，但其甜味延绵，带來类似甘茶甜素或甜菊苷的 苦后味。制备时，可用水或50%乙醉从干罗汉果中抽提，再经浓缩干燥而成， 外观呈无色粉末状。
三氣蔗糖在20弋、0. 1%水溶液中的表面张力仅为71.8mN/m，由于对水的 张力很小故几乎可以忽略不计。假如碳酸饮料中的表面张力大，会引起很多泡 沫，三氣蔗糖表面张力小，可以很好地应用于碳酸饮料的制造上，且适合于高速 瓶装和罐装生产线。
出邻亚磺酸苯甲酸屮酯，约lh后用H 酸测试反应终点应褪色。然后加人甲 苯，通氣气氧化，以2%联苯胺乙醉溶 液测试显深墨绿色为终点，静罝分层， 有机层为邻甲酸中酯苯磺酰氣平苯溶 液（简称磺酰氣）。依次将磺酰氣和水 加人胺化锅，在丨0尤时加氨水胺化， 温度可达70T，PH9以上，静置后取 下层铵盐液为邻甲酰苯磺酰亚胺铵溶 液（简称胺化液）。将胺化液放入酸碱 化锅内，加人甲苯和30%的盐酸到pH 为1，酸析后降温至20T.，取甲苯层 水洗去氣化铵得不溶性糖精甲苯溶液。 将此溶液加热，加入碳酸氢钠中和， 调PH至3.8 -4.0,静置后取水层， 加活性炭脱色、过滤，调滤液pH至 7，在70 ~ 75弋减压.浓缩，趁热过滤， 滤液经结晶、干燥得糖精钠。
曾尝试在大肠杆菌中表达重组奇异果素。在表达载体中插人以化学法合成的 奇异果素基因，所得的载体即转化成大肠杆菌菌株HB101。尽管通过SDS - PAGE和Western印迹分析可检测到重组奇异果素的存在，但是，所得的通组奇 异果素并不具味道修饰作用。在酵母和转基因烟草中的尝试结果也一样，尽管都 成功地表达出了重组奇异果素，但是产物也不具备甜味诱导活性。
由于Bntzzdn独特的科研和产业应用价值，大蛩生产高纯度的Brazzein成为 产业界的目标。Brazzein在天然植物中含量甚微，提取困难，产最受到限制。因 此利用基因工程，在其他宿主中表达该外源基因是快速冇效的途径。美国Nektar Worldwide公司已将Brazzein表达至玉米中，It转基因玉米中能提取1kg Brazzein。 另也曾尝试在酵母中表达合成Brazzein，但没有成功。这里讨论用大肠杆菌表达 Brazzein 基因。
“在对试验动物进行的甜蜜素及其主要代谢产物环己胺长期生物试验评价之 后，癌症鉴定委M会一致认为几乎没有可以信赖的數据表明甜蜜素是致癌物质， 不管何种性别的受试动物及何种组织器官均是如此”。
{三）乙酰基由4-C位向6-C位迁移